蛋白純化技術研討學習班

發布時間：2024-01-10

【蛋白純化技術背景介紹】

蛋白純化技術是從復雜生物樣品（如細胞提取物、組織液等）中分離并獲得高純度目標蛋白質的生物技術，重點應用在：

基礎科研：為解析蛋白質的結構、功能及相互作用提供純凈樣本，是酶學研究、蛋白質組學、結構生物學等領域的實驗基礎。

醫藥產業：是重組蛋白藥物（如胰島素、抗體藥物）、疫苗生產的核心環節，直接影響藥物的安全性和有效性。

工業生產：保障食品、洗滌劑等行業中酶制劑等蛋白產品的質量與活性，提升生產效率。

等生物醫藥各個領域，其重要性不言而喻，常用的蛋白純化技術可根據分離原理分為多種類型，以下是主要技術分類及特點：

一、基于溶解度差異的分離技術

利用蛋白質在不同溶液條件下（如鹽濃度、pH、溫度）溶解度的差異進行分離，操作簡單、成本低，常用于粗提。

鹽析法：通過加入高濃度中性鹽（如硫酸銨）破壞蛋白質的水化膜，使蛋白質沉淀析出。不同蛋白質的鹽析所需鹽濃度不同，可分步沉淀分離。

等電點沉淀法：調節溶液 pH 至目標蛋白質的等電點（pI），此時蛋白質凈電荷為零，溶解度最低而沉淀。適用于分離等電點差異較大的蛋白質。

有機溶劑沉淀法：加入乙醇、丙酮等有機溶劑，降低溶液介電常數，促使蛋白質脫水沉淀。需在低溫下操作以減少蛋白變性。

二、基于分子大小的分離技術

根據蛋白質分子質量（或體積）的差異實現分離，常用于去除大分子雜質或小分子污染物。

u透析與超濾：

透析：利用半透膜的選擇性透過性，使小分子雜質（如鹽、緩沖液成分）透過膜擴散到外部溶液，保留大分子蛋白質。適用于脫鹽或更換緩沖液。

超濾：在壓力驅動下，小分子通過超濾膜，大分子蛋白質被截留，可同時實現濃縮和脫鹽，效率高于透析。

u凝膠過濾層析（分子篩層析）：將樣品過填充有多孔凝膠顆粒的層析柱，小分子蛋白質進入凝膠孔隙，流經路徑長、流速慢；大分子無法進入孔隙，路徑短、先流出。根據洗脫順序可分離不同分子質量的蛋白質。

三、基于電荷差異的分離技術

利用蛋白質表面凈電荷的差異進行分離，分辨率較高，是常用的精細純化手段。

v離子交換層析：層析柱填充帶固定電荷的樹脂（陽離子交換樹脂帶負電，陰離子交換樹脂帶正電），目標蛋白質根據自身凈電荷與樹脂發生靜電吸附，再通過改變緩沖液的鹽濃度或 pH，使蛋白質解吸附并洗脫。適用于分離電荷差異明顯的蛋白質，如重組蛋白與雜蛋白的分離。

v等電聚焦電泳（IEF）：在凝膠中建立 pH 梯度，蛋白質在電場中遷移至自身等電點的 pH 區域后停止移動，形成聚焦帶，可實現高分辨率分離，常用于分析或微量純化。

四、基于特異性親和力的分離技術

利用目標蛋白質與特定配體的特異性相互作用（如抗原 - 抗體、酶 - 底物、標簽 - 配體）進行分離，特異性極強，是純化重組蛋白的核心技術。

親和層析：層析柱固定與目標蛋白特異性結合的配體（如抗體、金屬離子、鎳柱（His 標簽）、谷胱甘肽（GST 標簽）），樣品中只有目標蛋白會與配體結合，其他雜質直接流出；再用洗脫液（如含競爭性配體的溶液）將目標蛋白洗脫。一步純化即可獲得高純度蛋白，廣泛應用于帶標簽重組蛋白的純化（如 His-tag、Flag-tag 蛋白）。

免疫親和層析：以目標蛋白的特異性抗體為配體，特異性極高，適用于天然蛋白或無標簽重組蛋白的純化。

五、基于密度差異的分離技術

離心技術：通過離心產生的離心力，使不同密度、大小的蛋白質顆粒或細胞碎片沉降速度不同而分離。如差速離心可分離細胞碎片與上清液，密度梯度離心（如蔗糖梯度）可分離亞細胞結構或不同密度的蛋白質復合物。

六、其他輔助技術

電泳技術：如 SDS - 聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），除了用于蛋白純度鑒定，也可通過切膠回收實現微量蛋白的純化。

疏水作用層析：利用蛋白質表面疏水性與疏水柱填料的相互作用，在高鹽條件下結合、低鹽條件下洗脫，適用于分離疏水性差異較大的蛋白。

     由于蛋白純化技術種類繁多，技術復雜度高，實際使用過程中，需要根據樣本和純化蛋白的具體特性，各種技術靈活搭配組合使用，以獲得較好的純化效果，因此經驗性比較強，學習難度大，高校課堂也缺少相應的標準化、實戰化的課程體系，是產教融合課程體系構建的重點內容。

    為幫助企業研發技術人員、高校教師、研究生等深入學習這門技術，我們生物人學堂安排了蛋白純化技術產業活動周，邀請優秀的企業專家技術團隊紛紛“等堂獻藝”，展示蛋白純化技術的個中奧妙、技術細節。同時特邀在該領域有深厚積累的專業資深的產業專家、高校教師重點擔綱，為大家奉上一場蛋白技術學習的盛宴，歡迎大家積極參與，一起推動產教融合技術進步！

【學習安排】

三天吃透蛋白純化技術：從理論到實操，手把手帶你快速進階

多年經驗的傾囊相授，從樣品處理到目標蛋白分離的全流程解析，專家陪跑帶您快速進階！

理論 + 實操 雙軌教學，實戰化演練

l資深技術專家多年實戰經驗分享和原理深度解析

l理論講解結合技術實操，成熟技術轉移

l親和層析和離子交換層析典型方法案例實操學習

l從層析柱裝填、儀器操作到樣品預處理，純化、酶活分析、全程手把手指導，親自動手完成從粗提液到高純度蛋白的完整純化流程。

l數據分析和計算及常見問題解析，了解關鍵技術原理。

l學生技能大賽實驗設計輔導

l教師科研項目設計輔導

無論你是剛接觸蛋白純化的科研新人，還是想提升效率的實驗室骨干，抑或是高校的專業教師，三天時間，讓你從 “懂概念” 到 “能上手”，真正實現技術落地。名額有限，即刻報名，讓專業導師帶你跳過試錯坑，少走半年彎路，高效掌握蛋白純化核心技能！

線上學習 8月17-21 每晚8點

線下學習 8月22-24全天

   生物人基地專注于產業技術的深度學習和交流，圍繞相關產品工藝和技術細節進行深入的探討和交流，讓學員少走彎路，有效解決實際問題，期待您的到來！ 

【本期專家】

胡振新：生物化學博士，生物醫藥高級工程師，江蘇省產業教授/中國藥科大學獨墅湖基地研究生導師。主持國家省級項目（蛋白相關）2項。晶睿生物聯合創始人，從事蛋白純化25年，發表論文18篇，授權專利15項（其中發明專利8項）。2008-2012年師從美國資深科學院院士Benkovic進行博士后研究，2012年回國創業至今，發表論文總影響因子117。科技成果證書2項（第1完成人）。2013年獲得中國創業大賽二等獎，2015年獲得蘇州工業園區創業領軍人才，所創企業于2019及2024年獲得國家高新企業證書，2020榮登未來醫療100強分子診斷Top20。研究方向為蛋白工程化改造及創新性核酸檢測技術的開發等。現主持國家生物藥技術創新中心揭榜掛帥項目1項，江蘇省自然基金1項。

章驥：浙江大學生命科學院高級實驗師，武漢大學生物化學與分子生物學碩士畢業；2001.12–迄今，在浙江大學國家級生物實驗教學中心從事實驗教學達二十多年，主要參與生物化學實驗和發育生物學實驗建設與教學工作，具有豐富的生物學實驗教學經驗，出版教材生物化學實驗，ISBN 978-7-308-03025-0，浙江大學出版社，2002；參與教改項目2021年度第一批本科教材建設項目和本科MOOC建設項目（生物化學實驗），其主導的生物化學實驗課，獲得省一流課程。

【會議組織機構】

主辦單位：

上海臨港新片區生命藍灣產教聯合體

上海生物醫藥產業學院

上海高端醫療裝備產業園

上海嘉北生物醫藥科技發展有限公司

上海嘉定先進技術創新與育成中心

蘇州納米生物科技園

太倉沙溪生物醫藥產業園

協辦單位：

上海生物醫藥行業協會

上海市生物醫藥科技產業促進中心

承辦單位：

上海農林職業技術學院

上海楚豫生物科技有限公司/生物人教育培訓基地和跨企業培訓中心

支持單位：

全國生物技術職業教育教學指導委員會生物檢驗專委會      

【支持企業和媒體】

支持企業：上海雅心生物、上海金鵬生物、蘇州晶睿生物、上海昂玳醫學、上海柏辰生物、易孛特生命科學。。。

支持媒體：生物人、IVD工具人、生物器材網、IVD資訊 。。。

【活動形式】

線上大家談：邀請行業資深技術專家圓桌論壇，談產業發展和技術演化。

線上專題論述：就某一技術專題邀請產業專家詳細論述。

線下技術培訓交流：就具體技術細節和產品工藝實操演練學習。

線下展會：設備產品線下集中展示，歷時一個月，提供專業技術人員協助操作演示和試用，用戶學員可以來深入了解洽談交流。

參觀學習：參觀上海高端醫療裝備產業園“上海械谷/聯影小鎮”項目。

人才培養輸送：搭建蛋白技術產教聯盟，根據企業需求，為聯盟內的企業定制化招募培養和輸送蛋白技術技能人才。

本次學習圍繞蛋白純化技術的技術細分、操作流程、儀器設備、試劑耗材、交叉復合應用等系列內容，從線上到線下為大家詳細剖析，同時構建蛋白技術產教聯盟，聚集優質產業資源搭建一站式的服務平臺，適合企業研發/高校教師的業務提升、技術梳理和科研轉化，歡迎大家踴躍報名、積極參與。

【講課時間】

線下學習全年滾動開班，分期授課，本期學習時間如下：2025年8月17-24日

線上學習：

8月17-21日 每晚8點 線上直播學習

線下學習：

8月22-24日 全天 線下實操學習

【課程適合人群】

適合企業員工的技術梳理和深造，高校教師的業務提升，研究生的實驗技能學習以及本專科院校在校學生的興趣拓展和技術深入學習等，歡迎大家踴躍報名積極參與。 

【學習報名】
線上學習采取公益形式，不收取費用，人數不限，歡迎大家踴躍報名積極參與；線下學習涉及到實驗操作，為保證學習效果，每期招收人數控制在30人以內，會收取一定的實驗費用，歡迎大家及時報名。
公司名稱：上海楚豫生物科技有限公司
開戶銀行：中國民生銀行股份有限公司上海田林支行
帳號：691774185       

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